實驗十一 DNA的粗提取與鑒定
第六章 遺傳和變異
實驗十一 dna的粗提取與鑒定教學目的
1、初步掌握dna的粗提取和鑒定的方法
2、觀察提取出來的dna物質實驗原理
1、dna在nacl溶液中的溶解度，是隨著nacl的濃度的變化而改變的。當nacl的物質的量濃度為0.14mol/l時,dna的溶解度最低。利用這一原理，可以使溶解在nacl溶液中的dna析出。
2、dna不溶于酒精溶液，但是細胞中的某些物質則可以溶于酒精溶液。利用這一原理，可以進一步提取出含雜質較少的dna。
3、dna遇二苯胺（沸水浴）會染成藍色，因此，二苯胺可以作為鑒定dna的試劑。注意事項
1、步驟3析出含dna的黏稠物中，蒸餾水要沿燒杯內壁緩緩加入，不能一次快速倒入。
2、實驗中有多個步驟都要用玻璃棒進行攪拌，但是在不同的步驟中玻璃棒的用法不同。
實驗用具
雞血細胞液（5～10ml）；體積分數為95％的冷酒精，蒸餾水，質量濃度為0.1g/ml的檸檬酸鈉溶液，物質的量濃度分別為2mol/l和0.015mol/l的nacl溶液，二苯胺試劑；燒杯（100ml，1個， 50ml， 500ml，各2個），漏斗，試管（20ml，2個），玻璃棒，滴管，量筒（100ml，1個），紗布，鑷子，濾紙，鐵架臺，鐵環，三角架，酒精燈，石棉網，載玻片，試管夾。
課時安排 一課時
課前準備
制備雞血細胞液，方法是：將質量濃度為0.1g/ml的檸檬酸鈉溶液100ml，置于500ml燒懷中，注入新鮮的雞血（約180ml），用玻璃棒攪拌，使其充分混合，以免凝血。靜置于冰箱內一天，使血細胞自行沉淀。也可以用離心機離心2 min（轉速1000轉/分）。用吸管吸去上清液。
板書
實驗十一 dna的粗提取與鑒定實驗原理
1、析出溶解在nac1溶液中的dna。
2、用冷酒精提取出含雜質較少的dna。
3、dna在沸水浴時被二苯胺染成藍色。
方法步驟：
1、提取雞血細胞的細胞核物質：順時針方向攪拌，稍快，稍重。 5 min
2、溶解細胞核內的dna
3、析出含dna的黏稠物：蒸餾水300ml，逆時針方向攪拌，緩慢
4、過濾：取黏稠物
5、再溶解：順時針方向攪拌，較慢。3 min
6、過濾：取濾液。
7、提取出含雜質較少的dna，逆時針方向攪拌，稍慢。5 min
8、dna的鑒定：沸水浴5min（（1）無變化（2）藍色）上節課我們通過幾個驗證性實驗，證明了dna是主要的遺傳物質。那么dna是什么樣的物質呢？今天我們就通過實驗將它提取出來，進行觀察和鑒定。
通過預習，我們知道選用雞血細胞液作為實驗材料。在制備雞血細胞液時，所用的檸檬酸鈉有防止血液凝固的作用。 制備過程中，一定要用剛宰殺的雞的新鮮血，并且要與抗凝劑充分混合，防止凝血。我們采用靜置一天的方法，獲得雞血細胞液。
大家在動手做實驗之前先要明確幾個需要注意的問題。
1、要嚴格按照實驗指導的方法步驟去操作。
2、實驗中有多個步驟都要用玻璃棒進行攪拌，使用時玻璃棒不要碰到燒杯底，在不同的步驟中玻璃棒的用法不同，每一步的用法參照黑板上的指導去操作。
3、在dna的鑒定中，所用的二苯胺是一種有毒性的試劑，大家在使用時注意不要讓藥液接觸到皮膚或身體的其他部位，也不要近距離觀察。