6.2 DNA片段的擴增——PRC技術

pcr原理dna的復制需要酶、原料、能量、引物dna的變性和復性受溫度影響

pcr過程

變性

復性

延伸

操作步驟

配制pcr反應體系

移入離心管

放入pcr

設置工作參數

dna擴增

測定含量

稀釋

調零

測定并讀數

計算
（四）實例探究例1 在（    ）的溫度范圍內，dna的雙螺旋結構解開     a. 10－20℃     b. 80－100℃      c. 20－30℃     d. 40－60℃解析：蛋白質大多不能忍受60－80℃的高溫，而dna在80℃以上才會變性。答案：b例2 關于dna的復制，下列敘述正確的是（    ）a.   dna聚合酶不能從頭開始合成dna，只能從5’端延伸dna鏈b.   dna復制不需要引物c.   引物與dna母鏈通過堿基互補配對進行結合d.   dna的合成方向總是從子鏈的3’端向5’端延伸解析：由于dna聚合酶不能從頭開始合成dna，只能從引物的3’端即復制方向由3’端向5’端延伸；由于dna分子是反向平行的，子鏈是依據堿基互補配對原則，在dna聚合酶作用下合成的，其合成方向是從子鏈5’端向3’端延伸。答案：c☆綜合應用例3 下列有關pcr描述，不正確的是（    ）a.   是一種酶促反應b.   引物決定了擴增的特異性c.   擴增產量按y＝（1＋x）nd.   擴增對象是氨基酸序列e.   擴增對象是dna序列解析：pcr是一種體外迅速擴增dna片段的技術，它以極少量的dna為模板，以四種脫氧核苷酸為原理，在引物的作用下使dna聚合酶從引物的3’端連接脫氧核苷酸，短時間內迅速復制上百萬份的dna拷貝，其擴增產量為y＝（1＋x）n，y代表dna片段擴增后的拷貝數，x表示平均每次的擴增效率，n代表循環次數，因此答案選d。答案：d★課余作業1、pcr與生物體dna復制有何區別？2、如果在案件偵破過程中，只收集到一根毛發，但它所含的遺傳信息太少，該怎么辦呢？★教學體會教師在教學過程中，可以鮮引導學生回憶必修2的有關dna復制的知識，在此基礎上，學生可加深對于pcr原理的認識。對于pcr反應過程的教學，應以讀圖識圖為主。教材中反應過程圖解詳細的描繪了參與pcr的各種組成成分；每一輪反應的三個基本步驟—變性、復性、延伸；每一步驟的作用。教師在教學中可以請學生在讀圖的同時，結合教科書中的文字說明來加深理解。當學生遇到難以理解的地方時，教師要及時給予解答。