第一節 酶的制備及活力測定
第一節 酶的制備及活力測定【課標要求】研究酶的存在和簡單制作方法，嘗試利用酶活力測定的一般原理和方法。【知識梳理】背景知識 1、酶在活細胞內合成，在細胞內起催化作用，稱為________。1、生物細胞產生的酶2、由細胞內產生然后分泌到細胞外發揮作用，稱為________。 1、提取胞內酶，需要破碎________，可用破碎儀、研磨器或勻漿機 2、提取酶的方法 使酶從中釋放出來，進入細胞外的溶液中，經過濾、離心制備成________。 2、提取胞外酶，可直接從________________________中提取。 在酶的提取過程中，________、________等多種環境條件都可能影響酶的空間結構導致酶變性直至喪失活力。因而，提取出的酶首先需要檢測酶的________。 （1）定義：通常以單位時間內________或者單位時間內________ 3、酶的活力 （2）測定方法：________和________ 實踐案例：植物淀粉酶的制備及活力測定材料器具：略活動程序：1、提取酶液 2、滴加酶液：取4支試管編號后均加入ph=5.6的________________緩沖溶液。 向1、2試管中各加入未煮過的________ 1ml 向3、4試管中各加入已煮過的________ 1ml3、恒溫處理：為什么要進行恒溫40°c處理？答：保證酶在________溫度下充分發生反應。4、鈍化處理：鈍化處理的原因？答：使酶的活性________，從而使反應減慢或停止。5、測定吸光值：用分光光度計在波長________處進行比色。6、繪制標準曲線7、結果分析：（1）從標準曲線中查出________。 （2）計算淀粉酶的活力。探究活動：1、制備過氧化氫酶粗酶液以新鮮________、________________為材料經過粉碎、研磨、離心，取________即可得到過氧化氫酶粗酶液。2、用分光光度法測定過氧化氫酶的活力在過氧化氫酶存在時，過氧化氫將愈創木酚氧化生成________色產物，這種產物在波長470 nm處有最大吸收峰，通過測定________可以計算出過氧化氫酶的活力。3、用高錳酸鉀滴定法測定過氧化氫酶的活力如果在反應系統中加入________的過氧化氫溶液，經酶促反應后，在酸性條件下，用高錳酸鉀溶液滴定________的h2o2，然后根據消耗的h2o2量計算出過氧化氫酶的活力。高錳酸鉀滴定時：當出現________色并不再消退時標志著滴定達到終點。【復習指要】 1、學法指導：本節課應初步學會酶的制備及活力測定。學會使用滴定法的具體操作，并運用所學知識和方法去進行酶的活力的測定。本節課的酶的相關知識和酶的活力測定技術的知識應引起重視，在高考選擇題和實驗題中都有可能體現。2、疑難解析：在溫度、ph影響酶活性的實驗中，始終都貫穿著對照原則，而在設置對照實驗時最重要的是運用單一變量原則，其中的變量就是我們所研究的對象，所以在分析實驗問題時，要緊緊抓住研究變量，把其他可能影響實驗結果的變量變為常量，才能保證對照實驗結果的嚴密性和準確性。 對于溫度對酶活性影響的關系曲線，在低于最適溫度時，活性受溫度影響比高于最適溫度時的小。 【典題解析】1.在生物體內，各種化學反應之所以能有條不紊地進行，是因為（ ）a.酶的催化效率具有高效性 b.酶的種類具有多樣性 c.酶的催化作用具有專一性 d.酶的空間結構具有穩定性[解析]生物體內同時進行很多化學反應，這些化學反應是互不干涉的，因為催化各種化學反應的酶不同，對一種酶來講，只能催化一種或一類化學反應，即酶的專一性特點保證了各種化學反應互不干涉。[答案]c2.下列關于酶的敘述錯誤的是（ ）a.有些酶是核酸 b.酶的數量因與化學反應而減少 c.酶的活性與ph有關 d.酶的催化效率很高[解析]本題考查了酶的性質，酶是活細胞產生的一類具有催化作用的有機物，絕大多數的酶是蛋白質少數酶是rna。酶既具有無機催化劑的特點，又有本身的特點，高效性和專一性，并且需要適宜的條件。[答案]b【聚焦高考】1. （xx年全國高考題）將小麥種子分別置于200c和300c培養箱中培養4天，依次取等量的萌發種子分別制成提取液i和提取液ⅱ。取3支試管甲、乙、丙，分別加入等量的淀粉液，然后按下圖加入等量的提取液和蒸餾水，450c水浴保溫5分鐘，立即在3支試管中加人等量斐林試劑并煮沸2分鐘，搖勻觀察試管中的顏色。結果是（ d ）a、甲呈藍色，乙呈磚紅色，丙呈無色 b、甲呈無色，乙呈磚紅色，丙呈藍色c、甲、乙皆呈藍色，丙呈磚紅色 d、甲呈淺磚紅色，乙呈磚紅色，丙呈藍色2. (上海高考題)右圖為某酶在不同溫度下反應曲線和時間的關系，從圖中不能獲得的信息是（ d ）a、酶反應的最適溫度b、酶因熱而失活 生 成 物 時間70℃60℃20℃50℃30℃40℃c、酶反應生成物量與時間的關系d、酶反應速度和酶量的關系