生命活動的調(diào)節(jié)
實驗原理1. dna在nacl溶液中的溶解度,是隨著nacl的濃度的變化而改變的。當nacl的物質(zhì)的量濃度為0.14mol/l時,dna的溶解度最低。利用這一原理,可以使溶解在nacl溶液中的dna析出。2.dna不溶于酒精溶液,但是細胞中的某些物質(zhì)則可以溶于酒精溶液。利用這一原理,可以進一步提取出含雜質(zhì)較少的dna。3.dna遇二苯胺(沸水浴)會染成藍色,因此,二苯胺可以作為鑒定dna的試劑。
注意事項1.步驟3析出含dna的黏稠物中,蒸餾水要沿燒杯內(nèi)壁緩緩加入,不能一次快速倒入。2.實驗中有多個步驟都要用玻璃棒進行攪拌,但是在不同的步驟中玻璃棒的用法不同。
實驗用具:雞血細胞液(5~10ml);體積分數(shù)為95%的冷酒精,蒸餾水,質(zhì)量濃度為0.1g/ml的檸檬酸鈉溶液,物質(zhì)的量濃度分別為2mol/l和0.015mol/l的nacl溶液,二苯胺試劑;燒杯(100ml,1個, 50ml, 500ml,各2個),漏斗,試管(20ml,2個),玻璃棒,滴管,量筒(100ml,1個),紗布,鑷子,濾紙,鐵架臺,鐵環(huán),三角架,酒精燈,石棉網(wǎng),載玻片,試管夾。課時安排 一課時
課前準備:制備雞血細胞液,方法是:將質(zhì)量濃度為0.1g/ml的檸檬酸鈉溶液100ml,置于500ml燒懷中,注入新鮮的雞血(約180ml),用玻璃棒攪拌,使其充分混合,以免凝血。靜置于冰箱內(nèi)一天,使血細胞自行沉淀。(也可以用離心機離心2 min(轉速1000轉/分)。用吸管吸去上清液。
引言:上節(jié)課我們通過幾個驗證性實驗,證明了dna是主要的遺傳物質(zhì)。那么dna是什么樣的物質(zhì)呢?今天我們就通過實驗將它提取出來,進行觀察和鑒定。首先請一位同學說一說實驗原理。
問:通過預習,你知道選用什么實驗材料?課前準備是怎樣做的?(答:雞血細胞液。制備方法:略。)
問:在制備雞血細胞液時,所用的檸檬酸鈉有什么作用?(答:防止血液凝固。)
制備過程中,一定要用剛宰殺的雞的新鮮血,并且要與抗凝劑充分混合,防止凝血。我們采用靜置一天的方法,獲得雞血細胞液。
下面大家在動手做實驗之前先要明確幾個需要注意的問題:1.要嚴格按照實驗指導的方法步驟去操作。2.實驗中有多個步驟都要用玻璃棒進行攪拌,使用時玻璃棒不要碰到燒杯底,在不同的步驟中玻璃棒的用法不同,每一步的用法參照黑板上的指導去操作。3.在dna的鑒定中,所用的二苯胺是一種有毒性的試劑,大家在使用時注意不要讓藥液接觸到皮膚或身體的其他部位,也不要近距離觀察。
下面在實驗進行過程中,要思考每一操作步驟要達到什么目的。(教師巡視,指導)
在進行步驟1時,利用攪拌的5分鐘做如下提問:
問:為什么要加蒸餾水?加入蒸餾水后細胞將會怎樣?(答:讓細胞內(nèi)溶液的濃度大于周圍溶液的濃度,細胞會吸水以至脹破。)問:為什么要用力攪拌?(答:可以加速血細胞和細胞核的破裂。)
所以下一步驟過濾將濾去的是細胞膜和核膜等物質(zhì)。(在進行步驟3時,要向全班明確。)
這一步驟是這個實驗成敗的關鍵,注意加蒸餾水的方法和使用玻璃棒的方法,千萬不能太快太猛,防止打碎dna。(教師巡視,指導)
觀察濾取出來的黏稠物的顏色。有的同學提取的黏稠物較少,原因可能是在溶解dna時不充分,也可能是析出黏稠物時攪拌的快了。(教師巡視,指導)